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022-66387942一、熒光素純度重要嗎?
Goldbio熒光素純度為99.7%~99.8%,是市場上熒光素純度最高的產(chǎn)品。其它供應(yīng)商認為98%的純度就足夠了,然而,這不足以滿足嚴格的評估。比如,假如一個熒光素只有99%的純度(產(chǎn)品中含有1%的污染物)。如果純度不夠的1g熒光素溶于緩沖液中(對于體外研究來說一個標準的稀釋液),那么在緩沖液中將含有0.01g的污染物(即0.4g污染物/L)!如果按照分子量來計算那么在實驗中將含有1000g/mol的污染物,那么在溶液中污染物的濃度將是400 uM,這個濃度將抑制某些酶和細胞中的生物過程,且可能會給實驗結(jié)果帶來偏差,并且可能會對您的動物造成傷害。
二、甲殼蟲熒光素與螢火蟲熒光素之間有區(qū)別嗎?
甲殼蟲熒光素與熒光蟲熒光素之間沒有區(qū)別。
三、怎樣溶解熒光素鉀鹽或鈉鹽?熒光素鉀鹽或鈉鹽的穩(wěn)定性怎么樣?
溶解熒光素鉀鹽或鈉鹽于水中,然后分成等份凍存于-80℃,并沒有有害影響。通常鉀鹽以60mg/ml的濃度溶解,然而鉀鹽的最高溶解度是100mg/ml(自由酸不溶于水,但以10mg/ml的濃度溶于甲醇,或以50mg/ml的濃度溶于DMSO)。但關(guān)于溶解后的熒光素的穩(wěn)定性有一些沖突的報道,溶解之后可能會帶入溶液中一些氧,如果儲存的話最后用排空氣體的水溶解熒光素鉀鹽或鈉鹽。
對于較敏感的實驗,然而為了降低實驗中的可變因素(比如,低濃度的酶或不太合適的溫度或鹽濃度可能需要較高濃度的底物來驅(qū)動反應(yīng)的完成),我們建議反應(yīng)所需的試劑最好現(xiàn)配再用。
四、熒光素鉀鹽或鈉鹽之間有什么區(qū)別嗎?
熒光素鉀鹽與鈉鹽之間在應(yīng)用上無差別,在物理性質(zhì)上有小的差別,比如鈉鹽形式的熒光素某種程度上顆粒性更強一些且比鉀鹽形式的更溶于水。根據(jù)文獻引用的頻率,鉀鹽形式的熒光素的使用次數(shù)是鈉鹽形式的3倍,且大部分研究者喜歡用鉀鹽形式作用于活體,但是兩種鹽形式的熒光素都能很好地起到同等作用。
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