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探秘DMEM培養(yǎng)基配方的精妙平衡

 更新時間:2023-12-15    點擊量:475

Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM)培養(yǎng)基作為細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的重要組成部分,其配方的設(shè)計直接關(guān)系到細(xì)胞在體外環(huán)境中的生長和繁衍。本文將剖析DMEM培養(yǎng)基的配方,逐一解讀其中每一成分的作用,為科研人員提供詳實的培養(yǎng)基配方指南。

DMEM培養(yǎng)基配方成分詳解:

基礎(chǔ)培養(yǎng)基:

DMEMDulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基)是一種廣泛使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,可用于支持多種不同的哺乳動物細(xì)胞生長。原始的DMEM培養(yǎng)基配方中葡萄糖濃度為(1 g/L),DMEM高糖培養(yǎng)基包含4500 mg/LD-葡萄糖,其提供了培養(yǎng)基的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu),是營養(yǎng)的主要來源。

緩沖劑:

碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)(3.7 g/L),其使得DMEM高糖培養(yǎng)基能夠5–10% CO2的環(huán)境來維持生理pH值。

Hepes緩沖液:調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值,確保適宜的酸堿平衡。

氨基酸和維生素:

L-谷氨酰胺是細(xì)胞生長的必須氨基酸,為培養(yǎng)的細(xì)胞提供重要的能量來源,能促進(jìn)細(xì)胞生長,有助于細(xì)胞存活;

L-胱胺酸(Cystine)為蛋白質(zhì)和氨基酸代謝提供基礎(chǔ)。

L-蛋氨酸是轉(zhuǎn)甲基化和轉(zhuǎn)硫的前體。

維生素B群、維生素C和維生素E可滿足細(xì)胞對維生素的需求。

抗生素(通常為青霉素和鏈霉素)可預(yù)防微生物污染。

生長因子(可選):

表皮生長因子(EGF)和胰島素樣生長因子(IGF):可根據(jù)需要添加,促進(jìn)特定細(xì)胞類型的增殖。

如果需要,可以在DMEM中添加生長因子。但是添加的生長因子類型和數(shù)量應(yīng)根據(jù)特定的細(xì)胞類型和實驗需求來確定。是否在DMEM中添加生長因子,以及添加哪種生長因子,取決于實驗的具體需求和實驗?zāi)繕?biāo)。

以上僅列出DMEM培養(yǎng)基部分配方成分,對不同細(xì)胞培養(yǎng),可以根據(jù)細(xì)胞特性自行調(diào)整DMEM培養(yǎng)基配方。通過深入理解DMEM培養(yǎng)基的配方,科研人員可以更好地根據(jù)實驗需求進(jìn)行調(diào)整,為細(xì)胞提供精準(zhǔn)、有針對性的培養(yǎng)環(huán)境。中科百抗的DMEM培養(yǎng)基包含4.5 g/L葡萄糖、酚紅、L-谷氨酰胺和110 mg/L丙酮酸銨,以磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)作為緩沖液,不含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長因子的配方,因此在使用時需要額外補(bǔ)充10%的胎牛血清(FBS),以確保細(xì)胞得到充足的營養(yǎng)和生長所需的支持。

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