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022-66387942基因沉默主要指基因表達(dá)的抑制和沉默現(xiàn)象。在生物體內(nèi),基因的表達(dá)受到嚴(yán)格調(diào)控,而基因沉默就是一種重要的基因表達(dá)調(diào)控方式。根據(jù)作用方式的不同,基因沉默可分為自然發(fā)生的基因沉默和人為操作的基因沉默。自然發(fā)生的基因沉默可通過(guò)多種因素實(shí)現(xiàn),如DNA甲基化、異染色質(zhì)形成、轉(zhuǎn)錄后基因沉默(RNAi)等。而人為操作的基因沉默則可以通過(guò)基因敲除、轉(zhuǎn)錄因子抑制、表觀遺傳修飾等方法實(shí)現(xiàn)。那么,常用的基因沉默技術(shù)有哪些?一起來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!
RNA干擾(RNAi):RNAi技術(shù)利用雙鏈RNA(dsRNA)引發(fā)特異性mRNA的降解,從而降低或關(guān)閉目標(biāo)基因的表達(dá)。RNAi技術(shù)具有高效、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),已成為研究基因功能和藥物篩選的重要工具。然而,該技術(shù)也存在一定的脫靶效應(yīng)和細(xì)胞毒性等問(wèn)題。
化學(xué)沉默:化學(xué)沉默是指通過(guò)特定的化學(xué)抑制劑或藥物作用于細(xì)胞,干擾基因的表達(dá)或轉(zhuǎn)錄過(guò)程,從而實(shí)現(xiàn)基因沉默。常用的化學(xué)沉默藥物包括DNA甲基化抑制劑、組蛋白去乙?;敢种苿┑?。這類方法的優(yōu)點(diǎn)是可以通過(guò)口服或注射給藥,直接作用于患者體液或組織,但對(duì)于作用機(jī)制和藥物劑量要求較高。
基因敲除:基因敲除技術(shù)通過(guò)同源重組或CRISPR-Cas9等手段,將目標(biāo)基因進(jìn)行部分或wan全敲除。該技術(shù)具有較高的特異性和可操作性,但需要設(shè)計(jì)特異性的核酸酶,且存在一定的細(xì)胞毒性風(fēng)險(xiǎn)。
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